在研項(xiàng)目

口蹄疫(Foot-and-mouth disease，F(xiàn)MD)是一種由口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus，F(xiàn)MDV）引起的急性、熱性、高度傳染性的家畜疫病，其中豬、牛、羊等偶蹄動(dòng)物最為易感。口蹄疫具有發(fā)病急、傳播迅速、發(fā)病率高、宿主譜系廣、危害大等特點(diǎn)，曾多次在世界范圍內(nèi)流行，對(duì)全球畜牧業(yè)造成嚴(yán)重沖擊，WOAH將其列為必須上報(bào)的烈性動(dòng)物傳染病，我國(guó)也將其列為一類(lèi)動(dòng)物疫病?？谔阋卟《臼菃喂烧淩NA病毒，屬于小RNA病毒科、口蹄疫病毒屬，病毒粒子呈球形，無(wú)囊膜。其基因組全長(zhǎng)約8500 bp，依次由5’UTR、ORF和3’UTR組成。ORF編碼聚蛋白逐級(jí)降解成4種結(jié)構(gòu)蛋白（VP4、VP2、VP3和VP1）和9種非結(jié)構(gòu)蛋白（Lab/Lb、2A、2B、2C、3A、3B1、3B2、3B3和3C）。VP4完全位于衣殼內(nèi)部，VP1、VP2、VP3位于病毒粒子表面，為表面結(jié)構(gòu)蛋白，與病毒的抗原性有關(guān)；VP3蛋白主要參與衣殼的穩(wěn)定性；VP1蛋白大部分暴露于衣殼表面，是主要的抗原決定簇所在部位，其中G-H環(huán)是誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生中和抗體最關(guān)鍵的抗原表位，基于VP1核苷酸序列的系統(tǒng)發(fā)育分析，已廣泛用于口蹄疫病毒基因演化、流行病學(xué)調(diào)查、疫源追蹤和病毒遷移等規(guī)律的研究。

口蹄疫一年四季均可發(fā)生，多發(fā)于春、冬兩季，其宿主譜系廣范，其中豬口蹄疫在病毒的入侵方式、排毒途徑和疫苗的接種程序與牛羊口蹄疫不同。

1.1  傳播途徑不同  

豬口蹄疫主要以接觸傳播為主，飼喂口蹄疫病毒污染物（病豬的乳汁、排泄物、分泌物等）、直接接觸感染動(dòng)物、豬只處于嚴(yán)重污染的環(huán)境（圈舍、屠宰場(chǎng)、運(yùn)輸車(chē)輛等）均易感染口蹄疫病毒，與牛羊相比，豬對(duì)氣源性傳播并不易感，但是在低溫濕潤(rùn)的環(huán)境中，也可通過(guò)氣溶膠傳播口蹄疫病毒。?？谔阋咧饕ㄟ^(guò)呼吸道感染，也可通過(guò)皮膚、粘膜破口感染。而羊口蹄疫則主要通過(guò)呼吸道感染，通過(guò)空氣感染途徑，羊?qū)谔阋卟《揪哂泻芨叩母腥拘裕谝咔楸l(fā)期間，羊主要通過(guò)和患病動(dòng)物的接觸而感染。

1.2  感染劑量及病毒排毒情況不同  

豬蹄球接種1~10 IU可發(fā)病，而鼻內(nèi)接種需要1000 IU以上的病毒才能感染。牛所需感染劑量較小，舌面上皮接種1 IU、氣溶膠達(dá)10~100 IU病毒可使牛感染口蹄疫。羊經(jīng)由鼻內(nèi)和氣管內(nèi)接種所需的感染劑量為10000 IU，自然感染最低劑量為8 IU。發(fā)病豬在發(fā)病初期排毒量最大，感染7 d后會(huì)持續(xù)排毒4~5 d，在病毒血癥高峰期檢測(cè)氣溶膠病毒排毒量約為108 ID，是牛的1500倍。豬感染口蹄疫后可通過(guò)呼吸道排出大量病毒，被稱(chēng)為口蹄疫流行的“病毒放大器”；綿羊、山羊等宿主在感染后無(wú)癥狀持續(xù)攜帶病毒，被稱(chēng)為口蹄疫流行的“病毒儲(chǔ)存器”；牛對(duì)口蹄疫最敏感，因此被稱(chēng)為口蹄疫流行的“病毒指示器”。不過(guò)，經(jīng)感染口蹄疫病毒的豬康復(fù)后不會(huì)變成帶毒者，而綿羊、山羊的咽喉部在康復(fù)后4~6個(gè)月、牛咽組織在康復(fù)后6~24個(gè)月內(nèi)均可檢測(cè)到病毒。

1.3  免疫劑量不同  

豬對(duì)口蹄疫病毒免疫應(yīng)答相對(duì)遲鈍，豬免疫時(shí)需要高劑量的有效抗原，20世紀(jì)60~70年代荷蘭在免疫豬時(shí)使用的疫苗免疫劑量是牛的4~10倍。Morgan等通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究表明，A12-119株病毒免疫豬的最低有效抗原含量為160 ng，而牛的最低有效抗原含量為40 ng。McKercher等發(fā)現(xiàn)采用?？谔阋咭呙纾溲趸X水劑疫苗）免疫豬只時(shí)效果不佳，需要使用4~6倍劑量的?？谔阋咭呙缁蛴妥魟┮呙绮艑?duì)豬只具有一定免疫保護(hù)作用。

口蹄疫病毒分為7種血清型，包括O型、A型、亞洲1型（Asia1型）、C型、南非1型（SAT1型）、南非2型（SAT2型）和南非3型（SAT3型），某些血清型僅呈局部散發(fā)趨勢(shì)，具有明顯的地理分布特征，如Asia1型主要流行于亞洲（我國(guó)自2011年6月以后未見(jiàn)報(bào)告），SAT1、SAT2、SAT3則主要流行于非洲，而其它血清型特別是O型，廣泛流行于世界各大洲。

WOAH/FAO世界口蹄疫參考實(shí)驗(yàn)室根據(jù)毒株基因序列和區(qū)域進(jìn)化關(guān)系分析，又將口蹄疫病毒分為若干個(gè)遺傳拓?fù)湫汀８鶕?jù)遺傳分類(lèi)，我國(guó)目前主要流行東南亞拓?fù)湫停⊿EA型）、中東-南亞拓?fù)湫停∕E-SA型）和古典中國(guó)拓?fù)湫停–athay型）三種遺傳拓?fù)湫偷目谔阋卟《?，近年?lái)豬O型口蹄疫主要由以上遺傳群的病毒引起，其優(yōu)勢(shì)流行毒株是Mya98毒株、PanAsia和Cathay毒株。Mya98毒株屬于SEA型，是我國(guó)最主要的豬口蹄疫流行毒株；PanAsia毒株屬于ME-SA型，傳播能力很強(qiáng)，曾引起亞洲、非洲和歐洲大規(guī)模爆發(fā)口蹄疫疫情，目前在我國(guó)仍為地方性、散發(fā)流行；Cathay型毒株曾被稱(chēng)為“豬毒遺傳群”，主要感染豬，牛羊病例很少。豬A型口蹄疫按遺傳分類(lèi)分為歐洲-南美拓?fù)湫停‥u-SA型）、亞洲拓?fù)湫停ˋsia型）和非洲拓?fù)湫停ˋfrica型）三個(gè)遺傳拓?fù)湫?，每個(gè)型又包含有多個(gè)遺傳譜系的毒株，我國(guó)目前主要流行的是Asia型的Sea-97毒株?？谔阋邊⒖紝?shí)驗(yàn)室根據(jù)流行病監(jiān)控結(jié)果進(jìn)行毒株遺傳進(jìn)化關(guān)系分析，同時(shí)結(jié)合國(guó)外相關(guān)資料發(fā)現(xiàn)，Sea-97毒株是東南亞地區(qū)特有的一個(gè)A型流行毒。

據(jù)WOAH統(tǒng)計(jì)，2005-2021年間，全球共有40個(gè)國(guó)家和地區(qū)向WOAH通報(bào)豬口蹄疫疫情或疑似存在口蹄疫感染（豬）病例，在WOAH已公布的豬口蹄疫疫情中，共有O、A、Asia1、SAT1、SAT2五種血清型被通報(bào)，未見(jiàn)C型和SAT3型（表1）。

甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)王錫禎教授等通過(guò)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，中國(guó)最早有口蹄疫的記載是1893年前后，在云南西雙版納邊界地區(qū)曾經(jīng)流行過(guò)類(lèi)似口蹄疫的疫病。中國(guó)臺(tái)灣1913-1916年、1924-1929年前后兩次發(fā)生口蹄疫，到1997年已有68年未發(fā)生該病。1997年3月，中國(guó)臺(tái)灣爆發(fā)了O/Taiwan/97株引起的豬口蹄疫，僅三周傳至全島，屠宰了約38%（400多萬(wàn)）的豬，造成約60億美元的經(jīng)濟(jì)損失；2010年，亞洲發(fā)生由Mya98毒株引發(fā)的O型口蹄疫；2013年，廣東茂名發(fā)生由A/Se-97/G2毒株引起的A型口蹄疫（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/KF450794）。

2000年以來(lái)，我國(guó)采取全覆蓋免疫接種的豬口蹄疫防控策略，并結(jié)合強(qiáng)化檢測(cè)等諸多措施，我國(guó)豬口蹄疫疫情次數(shù)呈下降趨勢(shì)。但是鑒于周邊國(guó)家嚴(yán)峻的口蹄疫疫情情況，血清型多樣、流行毒株復(fù)雜，對(duì)我國(guó)造成了潛在的傳入風(fēng)險(xiǎn)，我國(guó)口蹄疫防控情形依然嚴(yán)峻。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部獸醫(yī)公報(bào)公布的動(dòng)物疫情數(shù)據(jù)顯示，自2010年以來(lái)，中國(guó)豬口蹄疫爆發(fā)點(diǎn)較多，全國(guó)17個(gè)省份共發(fā)生豬口蹄疫疫情51起（表2），累計(jì)6000余頭豬發(fā)病，主要集中在中國(guó)西北地區(qū)和東南部，其中發(fā)病血清型O型31起，A型5起，未通報(bào)血清型15起。

2011年6月以來(lái)我國(guó)未檢出Asia 1型病原學(xué)陽(yáng)性樣品，O型和A型為主要流行的豬口蹄疫血清型（表3）。相比于A型，我國(guó)O型豬口蹄疫流行情況更為復(fù)雜，2017-2018年，Cathay、Mya/7/98、PanAsia毒株分別引發(fā)8起、5起、1起豬口蹄疫感染事件。2018年以后，Cathay毒株逐漸成為優(yōu)勢(shì)流行毒株，Mya/7/98毒株嗜豬分支在國(guó)內(nèi)仍保持較強(qiáng)的流行勢(shì)頭和“發(fā)散式”進(jìn)化。

我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)具有養(yǎng)殖量大、調(diào)運(yùn)頻繁等特點(diǎn)，所以采用撲殺結(jié)合疫苗免疫的口蹄疫防控策略。其中疫苗質(zhì)量的高低直接關(guān)乎到免疫效果，疫苗質(zhì)量取決于疫苗有效抗原含量、疫苗種毒與流行毒株的匹配性、疫苗種毒的免疫原性等。2014年，《農(nóng)業(yè)部公告第2078號(hào)》對(duì)口蹄疫疫苗總蛋白含量、內(nèi)毒素等檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了規(guī)定，我國(guó)口蹄疫疫苗懸浮培養(yǎng)及純化濃縮工藝換代替換，高效液相色譜法檢測(cè)146s在疫苗中間產(chǎn)品質(zhì)量控制中廣泛使用，疫苗抗原含量及純度顯著提高，疫苗質(zhì)量不斷提升，為豬口蹄疫防控提供了有力物資。

農(nóng)業(yè)農(nóng)村部2018年1月2日發(fā)布通告，亞洲1型口蹄疫正式退出免疫，對(duì)亞洲1型口蹄疫的防控策略調(diào)整為以“檢測(cè)捕殺”為主，自2018年7月1日起全國(guó)停止生產(chǎn)、銷(xiāo)售、免疫含有亞洲1型口蹄疫病毒組分的疫苗。據(jù)國(guó)家獸藥基礎(chǔ)數(shù)據(jù)庫(kù)公開(kāi)數(shù)據(jù)顯示，截至2022年4月，我國(guó)現(xiàn)批準(zhǔn)上市的豬口蹄疫疫苗13種（表4），包括滅活疫苗、合成肽疫苗，表位缺失疫苗、病毒樣顆粒疫苗四類(lèi)（另有空衣殼疫苗暫未上市，口蹄疫亞洲1型疫苗因退出免疫暫未統(tǒng)計(jì)），均為O型或A型豬口蹄疫疫苗。目前，我國(guó)約150家獸用生物制品企業(yè)（廠）中，有9家企業(yè)（廠）生產(chǎn)口蹄疫疫苗。

獸用生物制品的批簽發(fā)數(shù)據(jù)在一定程度上反映了獸用疫苗生產(chǎn)數(shù)量以及需求情況。根據(jù)中國(guó)獸藥信息網(wǎng)獸藥基礎(chǔ)數(shù)據(jù)庫(kù)查詢(xún)系統(tǒng)(http://vdts.ivdc.org.cn:8081/cx/)的數(shù)據(jù)顯示(圖1，豬口蹄疫O型病毒樣顆粒疫苗等部分產(chǎn)品暫無(wú)數(shù)據(jù)，未統(tǒng)計(jì))，我國(guó)目前生產(chǎn)較多的是豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/Mya98/XJ/2010株+O/GX/09-7株）和豬口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗（Re-O/MYA98/JSCZ/2013株+Re-A/WH/09株）。鑒于Mya98毒株是2010年來(lái)危害我國(guó)畜牧業(yè)發(fā)展的主要流行毒株，因此這兩種疫苗批簽發(fā)數(shù)量高于其他疫苗。豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/Mya98/XJ/2010株+O/GX/09-7株）2014年批簽發(fā)數(shù)量在豬口蹄疫疫苗中所占比例較大，后批簽發(fā)數(shù)量逐年下降；O/GX/09-7株屬于O/Cathay毒株，2018年后O/Cathay毒株較為流行該疫苗批簽發(fā)仍然有一定數(shù)量。2019年豬口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗（Re-O/MYA98/JSCZ/2013株+Re-A/WH/09株）批簽發(fā)數(shù)量有所下降，2020年大幅度回升。

目前豬A型口蹄疫疫苗毒株較穩(wěn)定，免疫原性好，免疫效果好；而豬O型口蹄疫毒株遺傳變異快，免疫原性弱，免疫效果差，是口蹄疫防控需要關(guān)注的重點(diǎn)。口蹄疫O/Mya98系是近年來(lái)危害我國(guó)畜牧業(yè)發(fā)展的主要流行毒株，尤其是Mya/7/98嗜豬分支在國(guó)內(nèi)保持較強(qiáng)的流行勢(shì)頭。在重點(diǎn)防控Mya/7/98系的同時(shí)，還需關(guān)注發(fā)展勢(shì)頭迅猛的Cathay拓?fù)湫托仑i毒系毒株。我國(guó)是生豬養(yǎng)殖大國(guó)，豬口蹄疫疫苗市場(chǎng)占比比牛羊口蹄疫疫苗高，豬口蹄疫的防控是我國(guó)口蹄疫防控的關(guān)鍵，因此應(yīng)持續(xù)監(jiān)測(cè)豬口蹄疫流行態(tài)勢(shì)，合理預(yù)測(cè)未來(lái)毒株變異趨勢(shì)，通過(guò)交叉中和保護(hù)試驗(yàn)等監(jiān)測(cè)疫苗對(duì)流行毒株的免疫保護(hù)力，做好口蹄疫免疫及免疫效果評(píng)估，科學(xué)、有效、高效地防控口蹄疫。

參考文獻(xiàn)：略