近日，揚州大學獸醫(yī)學院葉建強教授課題組傳出喜訊，首創(chuàng)基于雞肝細胞系懸浮培養(yǎng)技術的高效價禽腺病毒（I群，4型）滅活疫苗（JH株），獲得國家三類新獸藥注冊證書，將為血清4型禽腺病毒病的有效防控提供強有力的武器。
血清4型禽腺病毒（FadV-4）是家禽心包積液-肝炎綜合征（HHS）的病原體，2015年以來該病在我國雞群暴發(fā)流行，已成為危害我國養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的重要家禽新發(fā)傳染病，給國內(nèi)家禽業(yè)造成了重大經(jīng)濟損失。針對該病的免疫防控關鍵技術研究已被納入國家十四五重點研發(fā)項目“動物疫病綜合防控關鍵技術研發(fā)與應用”重點專項。
此次新獸藥證書的獲得，可謂十年磨一劍。由揚大獸醫(yī)學院與國藥集團揚州威克生物工程有限公司等企業(yè)共同合作完成。這其中，葉建強教授帶領下的揚大獸醫(yī)學院學生科創(chuàng)團隊更是表現(xiàn)不俗。
在葉建強團隊中，動物醫(yī)學專業(yè)大四學生郭藝文帶領學生科創(chuàng)團隊開展創(chuàng)新研究，獲得了多項FAdV-4免疫防控新技術成果。他們首次創(chuàng)制了利用熒光標記重組病毒來檢測FAdV-4中和抗體的高通量快捷新型技術，比傳統(tǒng)技術縮短2～3天，為評估FAdV-4疫苗免疫效果提供了技術支撐。
學生科創(chuàng)團隊通過CRISPR/Cas9技術，首次創(chuàng)制了基于雙熒光高效篩選重組FAdV-4構建平臺以及多個表達家禽重要病原保護性抗原的重組FAdV-4弱病毒，為研發(fā)以FAdV-4為載體的基因工程多價多聯(lián)弱毒疫苗提供了技術與產(chǎn)品保障。其相關研究成果已在《Frontiers in Microbiology》（前沿微生物學）等期刊上發(fā)表，且申請了6項國家發(fā)明專利。
“傳統(tǒng)的重組禽腺病毒基因工程疫苗構建方法，往往需要對病毒的全基因組進行克隆操作，過程繁瑣、耗時費力。所以，我們一直在尋找提高重組禽腺病毒疫苗構建效率的辦法?！笨苿?chuàng)團隊成員徐貞琦介紹，通過查閱了大量資料后，他們發(fā)現(xiàn)CRISPR/Cas9系統(tǒng)作為一種新興的基因編輯技術，在基因編輯中操作簡單、靶向性好、編輯效率高，在重組病毒構建領域被廣泛應用。
創(chuàng)制一種疫苗已經(jīng)是不小的成果，構建一個平臺則是實現(xiàn)了又一次跨越。葉建強告訴記者，通過靶向并編輯病毒毒力基因fiber-2，學生科創(chuàng)團隊利用CRISPR/Cas9基因編輯以及Cre-LoxP重組等技術，創(chuàng)制了基于雙熒光篩選的表達外源基因的重組血清4型禽腺病毒平臺，該平臺可高效快捷鑒別與純化重組病毒，利用該平臺構建了表達H9N2禽流感病毒以及雞傳染性貧血病病毒等多個重要家禽病毒保護性抗原的重組FAdV-4基因工程候選弱毒疫苗，為有效聯(lián)防聯(lián)控FAdV-4與其他重要家禽病毒疫病提供了技術支撐與產(chǎn)品保障。
“傳統(tǒng)的滅活疫苗誘導體液免疫，而構建的重組基因工程弱毒疫苗能同時激發(fā)機體的體液免疫與細胞免疫，能提供更好的免疫效果?！比~建強稱，與團隊研發(fā)的高效禽腺病毒（I群，4型）滅活疫苗一樣，創(chuàng)制的表達多個重要家禽病毒保護性抗原的重組禽腺病毒弱毒疫苗在不久的未來有望投入實際生產(chǎn)中，為家禽重要病毒疫病防控保駕護航。
（記者 章勇）
來源：中國畜牧獸醫(yī)報
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