牛結(jié)節(jié)性皮膚?。↙SD）是由牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒（LSDV）引起的一種烈性、傳染性病毒病。為對(duì)LSD進(jìn)行早期防控，本研究利用基于orf068基因的重組酶聚合酶擴(kuò)增法（RPA）結(jié)合基于CRISPR-Cas12a的熒光法（RPA-Cas12a熒光法），建立了一種新的LSDV現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方法。結(jié)果顯示，新建的RPA-Cas12a熒光法以質(zhì)粒為模板，靈敏度可達(dá)5 copies/μL，而傳統(tǒng)檢測(cè)方法以病毒基因組DNA為模板，靈敏度為102 TCID50/mL；該方法與其他常見牛病毒無交叉反應(yīng)。此外，對(duì)40份牛臨床樣本的現(xiàn)場(chǎng)RPA-Cas12a熒光檢測(cè)結(jié)果顯示，診斷靈敏度為96.3%（95%CI:810~99.9%），特異性為92.31%（95%CI:62~109.6%），與定量PCR檢測(cè)結(jié)果相近。因此，本研究新建立的RPA-Cas12a熒光法在LSDV現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方面具有很好的應(yīng)用前景。
原文鏈接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35627121/
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